流式細(xì)胞儀分選方法

對(duì)FACSAria流式細(xì)胞儀96孔微孔板單個(gè)細(xì)胞分選方法進(jìn)行優(yōu)化和應(yīng)用。通過對(duì)液流的調(diào)節(jié)．獲得較穩(wěn)定的分選設(shè)定值；在96孔微孔板蓋上分選肉眼可見液滴，確定分選液滴在96孔微孔板每孔相對(duì)應(yīng)的蓋上的位置；分選結(jié)束后，計(jì)數(shù)單個(gè)細(xì)胞存在的細(xì)胞孔數(shù)；分選細(xì)胞培養(yǎng)7d后．記錄單個(gè)細(xì)胞存在孔數(shù)及單克隆形成的數(shù)量。結(jié)果5個(gè)細(xì)胞形成的液滴即肉眼清晰可見；96微孔板有單個(gè)細(xì)胞的孔數(shù)為80~90個(gè)，單個(gè)細(xì)胞獲得率為83．3％～93．7％，培養(yǎng)7d后，有活細(xì)胞存在的孔數(shù)為5～38孔，即單克隆形成率為6．3％～42．2％。分選前在96孔微孔板板蓋上分選肉眼可見液滴的簡(jiǎn)單方法使得對(duì)液流位置的判斷直觀可見：流式細(xì)胞儀96孔微孔板單細(xì)胞分選是一種簡(jiǎn)單易行，準(zhǔn)確有效地獲得單個(gè)細(xì)胞和單克隆的方法。