紫外分光光度計(jì)的工作原理

紫外分光光度計(jì)，就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計(jì)在檢測(cè)的*步的時(shí)候，首先要做到為儀器選擇合適的波長(zhǎng)范圍，否則會(huì)很容易對(duì)被測(cè)物體的結(jié)果造成誤差，紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長(zhǎng)的光。紫外分光光度計(jì)廣泛應(yīng)用于冶金、機(jī)械、化工、衛(wèi)生、臨床檢驗(yàn)、生物化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、食品、材料科學(xué)等領(lǐng)域的生產(chǎn)、教學(xué)和科研工作中，特別適合對(duì)各種物質(zhì)進(jìn)行定量及定性分析。

紫外分光光度計(jì)工作原理

物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同。因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。

又因?yàn)樵S多物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法對(duì)這些物質(zhì)分別進(jìn)行測(cè)定（定量分析和定性分析）。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。

首先確定實(shí)驗(yàn)條件，并在此條件下測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸收峰以及其對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)值（同時(shí)可獲得該物質(zhì)的zui大吸收波長(zhǎng)）；再在選定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)（或zui大波長(zhǎng)值處），分別以（不同濃度）標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標(biāo)繪出化合物溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線得到其所對(duì)應(yīng)的數(shù)學(xué)方程；接著在相同實(shí)驗(yàn)條件下配制待測(cè)溶液，測(cè)得待測(cè)溶液的吸光度，zui后用已獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求出待測(cè)溶液中所需測(cè)定的化合物的含量。

凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物，根據(jù)在特定吸收波長(zhǎng)處所測(cè)得的吸收度，可用于的鑒別、純度檢查及含量測(cè)定。